Tato metoda mikropropagace patří mezi zajímavé tím, že koeficient množení je poměrně vysoký. Je možné ji však užít pouze u poměrně malého druhů rostlin. Patří mezi ně lilie, begónie, hyacinty, některé rosnatky, mucholapka a především nejčastěji publikovaná Saintpaulia - africká fialka. Principem je tvorba adventivních pupenů a následně prýtů, přímo na explantátu (list , cibule, stonek, oddenek). Většina rostlin vyžaduje ke startu kombinaci cytokininu s nižší koncentrací auxinu. Ale třeba lilie potřebuje k stimulaci auxin. Dostáváme se opět ke známému, každá rostlina vyžaduje něco jiného, no a v tom je krása TC.
Drosera dielsiana - tvorba adventivních pupenů a následný růst prýtu na lístku
Drosera dielsiana
Drosera rotundifolia
Odvození kultury ze segmentu stonku květenství Drosery capensis
Dionaea muscipula - reakce patrná v pasti a v druhém případě v bazální části listu v ploše svrchní epidermis
Agapanthus
Lilie Nilská. Řadí se k nejčastěji portrétovaným květinám Claude Moneta. Pochází z Jižní Afriky. Patří k symbolům jara na ostrově Madeira. Letos doma takto vykvetla a už je v agaru.
Solanum - prorůstání prýtů z řezné plochy stonkového segmentu
Postup mikropropagace budu demonstrovat na segmentech z lístků africké fialky. Po sterilizaci lístku a jeho opláchnutí od zbytků desinfekčního činidla, lístek v boxu rozřežeme na segmenty rozměru cca 15x15 mm a umístíme svrchní stranou na povrch živného média.
Explantát rozměru cca 15x15 mm umístěn na živné médium.
Iniciace.
Postupné prorůstání prýtů v ploše explantátu
Po rozdělení rostlinek a přesazení na čerstvé médium je růst velmi intenzivní.
Množitelský koeficient je u těchto technik vysoký.
Od umístění lístku na médium uběhlo 6 měsíců, do dalšího kola postupuje 12 kontejnerků.
Zakořeňování a aklimatizace
Snažit se o vytvoření funkčního kořenového systému v podmínkách in vitro je neekonomické. Fialka velice ochotně po ošetření báze stimulátorem zakořenění v podmínkách ex vitro, při postupné aklimatizaci na sníženou vlhkost prostředí.
Aklimatizované - nároky Af na osvětlení jsou nízké,
zaléváme do misky a čekáme až nás překvapí svým květem.
Tato technika patří také mezi ty méně bezpečné. Při této metodě se častěji můžeme setkat se vznikem mutantních regenerantů. Velmi snadno na bohatších médiích tvoří kalus a následně z něj regenerují rostlinky. Příklad mutace, který byl zobrazen v čl. 3. tohoto elaborátu, měl postupně tento vývoj.
Postupně odrůstající nové lístky se barví do žluta
Zůstávají pouze drobné zelené fragmenty
přežije-li do jara půjde zpátky do agaru
Africká fialka snáší poměrně dobře i tvrdší sterilizaci a celkem i přehmaty při sestavování médií. (Roste i pod kobercem.) Tím je vděčnou pro učení práce v aseptickém prostředí.
K dalšímu příkladu mutace je možné uvést lístek mucholapky, který je v bázi pasti rozdvojen a tvoří trojúhelníkovitý útvar . V řadě případů, jako v posledních letech uváděná mutace chlupaté Pom-Pom, může dojít k tomu, že se v průběhu dalšího růstu vrátí do původní podoby.
ukázky grafického zpracování
po kliknutí na obrázek je možné ho zvětšit na původní velikost
